Tentativa de isolamento primário de T. cruzzi de pacientes crônicos de Doença de Chagas por hemocultura - Agentes bloqueadores / Attempts of primary isolation of T. cruzzi from patients with chronic Chaga's disease. Bloking agents

RESUMO

Em 250 tentativas de isolamento primário de T. cruzi, de pacientes crônicos, foram realizados 04 (quatro) experimentos distintos, de que participaram respectivamente, 100, 100, 30 e 20 pacientes. Nos 03 (três) primeiros experimentos o sangue por hemocultura foi colhido com heparina na proporçäo de 1 gota/5 ml (5000u/5ml). Todos os casos foram cultivados em meio LIT, 130 o foram também em meio 199 mais soro fetal bovino a 30 pôr cento (SFB 30 pôr cento) e no meio anterior suplementado com extrato total de barbeiro (T. infestans). Todos estes 230 casos foram incubados por 60 dias e 26ºC e examinados de 15/15 dias. No último experimento a hemocultura também foi realizada em meio LIT, mas o sangue foi colhido com E.D.T.A. em todos os 20 casos: 10 destes foram lavados antes de inoculados, os outros 10 näo foram lavados. A incubaçäo foi feita a 26 ºC e foi mantida por tempo igual ou superior a 90 dias. Os resultados dos exames foram negativos nos primeiros 230 casos dos 03 (três) primeiros experimentos e foram positivos em 02 (dois) dos 10 casos lavados e em 06 (seis) dos näo lavados, colhidos em E.D.T.A. da última experiência. A heparina mostrou-se um agente bloqueador importante para o isolamento do T. cruzi, constituindo-se em conjunto com período de tempo de observaçäo do cultivo como os mais importantes fatores para o sucesso ou insucesso do isolamento. Os experimentos realizados com cepas de T. cruzi, previamente isolados mostraram que os trypanosomas podem crescer e alguns se mantêem vivos, por períodos täo longos quanto 40 dias em presença de soro imune específico ou näo imune, mas com complemento em proporçöes täo altas quanto 20 pôr cento, todavia näo ultrapassam os 40 dias em cultura na presença de heparina em concentraçöes iguais à usada para coleta de sangue