Purification of Staphylococcal enterotoxins B and C2, by dye ligand chromatography - production of antisera

RESUMO

As enterotoxinas estafilocócicas B e C2 foram purificadas a partir do sobrenadante de culturas, através de cromatografia de troca catiônica em resina Amberlite CG-50 e cromatografia de afinidade com o corante Red A. Cem mililitros de sobrenadante de culturas contendo 270 mg de SEB/ml e 150 ml de sobrenadante contendo 93 mg de SEC2/ml proporcionaram uma recuperaçäo final de 59 por cento e 42 por cento, respectivamente. As toxinas purificadas apresentaram-se homogêneas quando analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida dodecil-sulfato de sódio. A imunizaçäo de coelhos com as enterotoxinas purificadas forneceram títulos máximos de 80 para a enterotoxina B e 40 para a enterotoxina C2. A metodologia descrita neste trabalho mostrou-se adequada para a purificaçäo de enterotoxinas B e C2, visando a obtençäo de reagentes e produçäo de anticorpos específicos, utilizando pequenos volumes iniciais de sobrenadante de culturas