Simposio: cirugía experimental en México (parte I): producción in vivo e in vitro de óxido nítrico por hepatocitos / Symposium: experimental surgery in Mexico (part l): in vivo and in vitro production of nitric oxide by hepatocytes

RESUMEN

Objetivo: Demostrar que el óxido nítrico producido por el hígado juega un papel protector en este órgano durante episodios de sepsis. Diseño: Estudio experimental en animales, prospectivo con grupo control. Material y métodos: Se utilizaron ratas Sprague-Dawley machos con peso entre 200 y 250 g. Para experimento in vivo, los animales recibieron una sola inyección de 28 mg/kg/IV de Corynebacterium parvum; ratas normales se emplearon como controles y donadores de hepatocitos para los estudios in vitro. Los hepatocitos normales y estimulados con C. parvum fueron aislados utilizando una modificación a la técnica de perfusión de colagenasa in situ; fueron colocados en platos de Petri con una capa de gelatina de 100 mm en 6 ml de medio de cultivo que contenía L-arginina, insulina, L-glutaminam, penicilina, streptomicina y 10 por ciento de suero bajo en endotoxina. Después e 24 h en cultivo los hepatocitos recibieron medio frasco adicionado de citoquinas (INF+TNF+IL-1) y endotoxina (LPS para estimular la producción de óxido nítrico in vitro. Los sobrenadantes fueron colectados, almacenados y sujetos a medición de NO2 + NO3 empleando un método automático colorimétrico