Porfiria cutanea tarda: detección de una mutación en la uroporfirinogena decarboxilasa mediante RT-PCR y secuenciación directa / Porphyria cutanea tarda: detection of the new mutation in the uroporphyrinogen decarboxylase intervening RT-PCR direct sequenced

RESUMEN

La porfiria cutánea tardía familiar (PCT-F) y la porfiria hepatoeritropoyética (PHE), son dos porfirias cutáneas causadas por la deficiencia en la actividad de la Uroporfirinógeno Decarboxilasa (URO-D), que es la quinta enzima del camino biosintético del hemo y cataliza la conversión del Uroporfirinógeno(UROgen) a Coproporfirinógeno (COPROgen). La PCT-F es dominante y la actividad de la URO-D está reducida a un 50 por ciento en todos los tejidos mientras que la PHE es recesiva y en ella la activcidad de la URO-D es sólo de un 5-10 por ciento del valor normal. El gen de la URO-D está compuesto por 10 exones dentro de 3 kb. Partiendo de 15 ml de sangre entera, y realizando separación de linfocitos, extracción de ARN, RT-PCR y secuenciación directa de las casi 1,2 del ADNc de la URO-D, se ha encontrado en un paciente argentina con PCT-F una mutación nueva caracterizada por la deleción del exón 9, La PCR y secuenciación del ADN genómico revelo que la deleción es causada por la transición G A en la última base del exón 9 que afecta la maduración ("splicing") del mensajero ya que inactivaría el sitio doner de "splicing" del intrón 9, como consecuencia se produce la unión entre el exón 8 y 10 lo cual a su vez lleva a un corrimiento de marco de lectura, que predice la síntesis de una proteína truncada con una perdida total de casi el 20 por ciento de sus aminoácidos