Açäo de íons Fe+++ no sistema de óxido-reduçäo do glutation e na lipoperoxidaçäo de membrana em eritrócitos humanos / Lipid peroxidation, antioxidant enzymes and glutathione levels in human erythrocytes exposed to ion Fe+++

RESUMO

Várias säo as doenças que estäo relacionadas ao desequilíbrio entre a açäo de agentes oxidantes e o sistema de defesa do órgäo acometido. Dentre elas destaca-se a hemocromatose transfusional, na qual a funçäo de vários órgäos está comprometida pelo excesso de ferro. Nesta condiçäo, pouco é conhecido sobre o papel e as consequências da sobrecarga deste metal no eritrócito. A presença de ácidos graxos polinsaturados na membrana, do ferro ligado à hemoglobina, e de altas tensöes de oxigênio em seu interior permite supor que o eritrócito é, intrinsicamente, uma célula vulnerável ao estresse oxidativo. Alguns autores, que utilizam a sobrecarga de ferro com o intuito de provocar estresse oxidativo eritrocitário, verificaram diminuiçäo dos níveis de GSH e aumento de lipoperoxidaçäo mensurada pelo MDA. Com a finalidade de estudar a ocorrência da lipoperoxidaçäo e as possíveis alteraçöes do sistema anti-oxidante do glóbulo vermelho em funçäo da exposiçäo ao Fe+++, o presente trabalho analisou as variáveis glutation reduzido (GSH total), glutation oxidado (GSSG), índice de estresse oxidativo (R=GSSG/GSHtotal-GSSG), CATALASE, glutation redutase (GSH-Rd), glutation peroxidase (GSH-Px), superóxido dismutase (SOD) e malonaldeído (MDA) de eritrócitos normais submetidos a diferentes concentaçöes de ferro. O estudo foi realizado em duas fases, sendo que na primeira foram estudadas todas as variáveis eritrocitárias citadas acima, em funçäo de seis concentraçöes de ferro (0, 1, 5, 10, 50 e 100 uM Fe+++). Na segunda fase, foi analisado o GSH total de hemolisados e sobrenadanantes em 50, 100, 150, 200, 250 e 300 segundos de leitura espectrofotométrica. Nesta fase, foi também avaliada a interferência do tampäo EDTA no nível de GSH total de hemácias submetidas a quatro concentraçös de Fe+++ (0, 5, 10 e 100 uM Fe+++). Os resultados da Fase I näo mostraram diferenças significativas quando as variáveis foram analisadas em funçäo do aumento da concentraçäo de Fe+++. Entretanto, em relaçäo aos outros grupos, os resultados sugerem que eritrócitos incubados com 5 e 10 uM Fe+++ estäo sob estresse oxidativo máximo, documentado pelo alto índice R de 0,07 M/M, e a incubaçäo com 5, 10 e 50 uM Fe+++ provoca lipoperoxidaçäo de membrana, mensurada pelo MDA, maior que nos outros grupos. Apesar de näo termos observado alteraçöes enzimáticas eritrocitárias (GSH-Rd, GSH-Px, CATALASE e SOD), pode ser inferido que com as incubaçöes de 5 e 10 uM Fe+++ ocorre entrada de ferro no eritrócito...