Influência do descongelamento seriado do soro na detecçäo de auto-anticorpos (AAC) em doenças reumáticas auto-imunes (DRAI) / Detection of autoantibodies on serum aliquots submitted to serial freeze-thaw cycles

RESUMO

Introduçäo: Os auto-anticorpos (AAC) säo de grande relevância clínica em doenças reumáticas auto-imunes (DRAI), tanto para diagnóstico quanto para monitoraçäo terapêutica. Sua presença pode variar de acordo com a atividade da doença, tratamento ou condicionamento do soro. Diversos estudos clínicos utilizam alíquotas de soro estocado rotineiramente, acreditando que este permaneça estável, apesar do tempo decorrido e da repetiçäo de ciclos de congelamento/descongelamento; porém, a manutençäo da reatividade de soros estocados frente a diversos antígenos näo foi avaliada de modo sistemático. Com relaçäo a alguns AAC específicos, como a anticardiolipina e o anticolágeno do tipo II desnaturado, é sabido que sua detecçäo é alterada pelo calor e pela estocagem do soro. Objetivo: Investigar a influência de ciclos de congelamento/descongelamento do soro na detecçäo de AAC em soros de pacientes com DRAI. Casuística e método: Foi coletado o soro de dez pacientes com DRAI acompanhados no ambulatório da Disciplina de Reumatologia da Unifesp. Os soros foram separados e divididos em duas alíquotas (A e B), que foram congeladas a -20 C. A amostra B foi submetida a 100 ciclos diários de descongelamento por uma hora, seguido de recongelamento a -20 C. A alíquota A näo foi submetida a nenhum ciclo, sendo mantida a -20 C até o momento do uso. Foram realizados os seguintes testes imunológicos FAN (imunofluorescência indireta em células HEp-2), fator reumatóide (aglutinaçäo pelo látex), anti-ENA (imunodifusäo dupla, hemaglutinaçäo passiva e ELISA) e anticardiolipina (ELISA). Resultados: Näo se observou qualquer diferença entre as alíquotas A e B em relaçäo ao padräo ou título de AAC por imunofluorescência indireta (IFI), nenhuma variaçäo dos títulos do FR, anti-ENA (DO por ELISA), imunodifusäo e anticardiolipina por ELISA. Houve queda no título do anticorpo anti-SS-A/Ro quando detectado por hemaglutinaçäo passiva na alíquota B de três soros. Conclusäo: Os resultados mostram que a detecçäo de AAC näo se modifica após repetidos ciclos de congelamento/descongelamento. Entretanto, a sensibilidade da reaçäo de hemaglutinaçäo passiva pode estar diminuída em alíquotas antigas e utilizadas diversas vezes