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Resposta imune anti-proteínas de choque térmico na leishmaniose visceral / Anti-HSP immune response in visceral leishmaniasis
Recife; s.n; 1997. 90 p. ilus, mapas, tab, graf.
Thesis in Portuguese | LILACS | ID: lil-230845
RESUMO
A leishmaniose visceral (calazar) é um importante problema de saúde pública na regiäo Nordeste do Brasil, onde cerca de 3 milhöes de pessoas estäo sob o risco de contrair a doença. O diagnóstico precoce ajuda a reduzir a mortalidade, estimada em 10 por cento. Os métodos diagnóticos parasitológicos säo invasivos e têm uma sensibilidade de aproximadamente 70 por cento. A sorologia pode ser uma ferramenta importante no estabelecimento de um diagnóstico definitivo, mas tem a desvantagem de apresentar reaçöes cruzadas com outras doenças, endêmicas nas mesmas regiöes onde ocorre o calazar. Para evitar a complexidade antigênica que acompanha qualquer teste sorológico que utilize extratos de parasitas inteiros como antígeno, procedemos à triagem de bibliotecas de cDNA de Leishmania com o soro de um paciente calazar. Nosso objetivo era encontrar antígenos específicos, e selecionamos um antígeno que foi reconhecido especificamente pelo soro de pacientes com calazar. Através da análise de sequências de DNA mostramos que os antígenos estudados representam a fraçäo carboxi-terminal da proteína de choque térmico de 70kDa de Leishmania (HSP70). As proteínas de fusäo foram parcialmente purificadas através da eletroforese, em géis preparativos de poliacrilamida-SDS, dos sonicados de E.coli transformadas. Estas proteínas foram em seguida utilizadas no ELISA para o diagnóstico do calazar humano e canino. O teste mostrou-se mais sensível e específico que o ELISA convencional e consideravelmente mais específico que a imunofluorescência indireta. Além disso, utilizando Western blots de antígenos de E.coli foi transformadas e soros imunoadsorvidos contra HSP70 e HSP90 recombinantes, foi possível demonstrar que a resposta imune humoral é fortemente dirigida contra ambas as HSP. Através do uso de cDNA progrssivamente mais longos, estendendo-se a partir da cauda poli-A para a extremidade 5` do referencial aberto de leitura HSP70, e da expansäo destes clones em E.coli, mostramos que os epitopos de linfócitos B estäo distribuidos na parte carboxi-terminal da HSP70. Säo descritos também alguns resultados preliminares do usoda HSP70 recombinante na vacinaçäo de cäes, assim como uma discussäo abrangente do papel das HSP na leishmaniose
Subject(s)
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Index: LILACS (Americas) Main subject: Leishmaniasis, Visceral Type of study: Screening study Limits: Animals / Humans Language: Portuguese Year: 1997 Type: Thesis

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