Construcción de una sonda de DNA para identificar Adenovirus humanos

RESUMEN

Fragmentos de restricción del DNA del Adenovirus humano tipo 8, fueron ligados al plásmido pBR322 a nivel del gen de resistencia a la tetraciclina y clonados en la E. coli HB101. El plásmido recombinante obtenido del clón bacteriano No. 117 fué seleccionado como sonda para realizar ensayos de hibridazación, utilizando marcaje radioactivo. Según análisis de restricción e hibridización, éste plásmido contiene un fragmento de DNA viral con una longitud aproximada de 4.65 Kb, que corresponde a la región del genoma localizada entre 55.1 y 68.8 um, la cual codifica para la proteina del hexón y para la proteina 55 Kd, que estáligada al extremo 5' del DNA viral. La sonda clonada fué evaluada mediante la técnica de hibridización "dot blot", empleando DNAs de Adenovirus representantes de los subgéneros A, B, C, D, y E. Los resultados permitieron concluir que la región del genoma Adenoviral localizada entre 55.1 y 68.8 um, contiene secuencias nucleotidicas homólogas en 5 diferentes subgéneros y por lo tanto podría utilizarse como sonda para detectar ácido nucleico a partir de muestras clínicas