Diagnóstico de ileítis porcina por medio de la reacción en cadena de la polimerasa / Polymerase chain reaction for diagnosis of porcine ileitis

RESUMEN

La ileítis porcina es una enfermedad que ocasiona importantes pérdidas económicas a la industria porcina. El agente causal de esta enfermedad es Lawsonia intracellularis, un microorganismo de dificl cultivo. Por esta razón, el diagnóstico, generalmente se realiza sólo al sacrificio. Debido a la dificultad del diagnóstico en animales vivos, se han desarrollado técnicas para detectar el ADN de la L. intracellularis por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El objetivo de este trabajo fue evaluar la técnica de PCR para el diagnóstico de la ileítis porcina en muestras de mucosa intestinal y heces de cerdos sospechosos de la enfermedad. El ADN fue extraído usando tierras diatomeas y tiocainato de guanidina. Para la amplificación del ADN se utilizaron oligonucleótidos específicos que amplifican un fragmento de ADN de L. intracellularis de 319 pb. La estandarización de la técnica se realizó a partir de mucosa intestinal de un cerdo infectado experimentalmente. La mínima cantidad de ADN de mucosa infectada que se detectó por PCR fue de 3.72 ng. Cuando la mucosa infectada fue adicionada a muestras de heces normales se necesitaron 12.4 ng del ADN extraído, para obtener un producto de amplificación visible. El producto de amplificación esperado de 319 pb fue también obtenido de mucosa intestinal o muestras de heces de cerdos infectados con signos clínicos característicos de ileítis porcina. Se concluyó que la técnica de PCR puede ser muy útil para el diagnóstico de esta enfermedad y para la determinación de la prevalencia de la ileítis porcina en diferentes áreas