Identificación molecular del Gen RhD mediante PCR / Molecular identification of the RhD gene by PCR

RESUMEN

Introducción. Con objeto de identificar al gen Rh(D) en sujetos positivo, se elaboró una estrategia basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Material y métodos. Se estudiaron a 8 sujetos adultos, identificando el fenotipo del sistema Rh (CcDEe) con técnicas inmunohematológicas. Se extrajo el DNA genómico a partir de leucocitos de sangre periférica y se utilizaron dos iniciadores (24C y R13N) para la amplificación. Este par de iniciadores delimitan las secuencias comunes entre los exones 4 y 5 de los genes RhD y RhCE. Resultados. Inmunológicamente se identificaron cinco sujetos Rh negativo y tres Rh positivo. En la imagen electroforética, se observaron dos patrones de amplificación: uno de dos bandas (de 600 pb y de 1200 pb) y un segundo patrón de una sola banda (de 1200 pb). La banda de 1200 pb se amplificó en los sujetos Rh positivo y negativo (y corresponde al gen RhCE). La banda de 600 pb, sólo se presentó en sujetos Rh positivo (correspondiente al gen RhD). No hubo diferencias entre los resultados inmunohematológicos y el análisis molecular en los diferentes fenotipos. Conclusiones. El empleo de esta estrategia basada en la técnica de PCR, permite la tipificación del gen RhD en los sujetos Rh positivo, con diferentes fenotipos del sistema Rh