Anticorpos anti-HBs obtidos em coelhos e sua utilizacao como reagentes para testes sorologicos no diagnostico da hepatite B. / Anti-HBs antibodies obtained in rabbits and its use as reagents for serological tests in the diagnosis of hepatitis B

RESUMO

Pela tecnica de cromatografia de afinidade utilizando-se a resina de Sepharose 4B ligada ao anti-HBs, obteve-se na passagem de plasma de portador assintomatico de antigeno HBs, um antigeno parcialmente purificado. Este antigeno foi utilizado para a inoculacao em coelhos, num esquema de cinco doses, sendo a primeira dose de 1 mg e as quatro subsequentes de 0,5 mg, com intervalos aproximadamente de quinze dias.Obsevando-se que os titulos nao mais variaram apos a quinta inoculacao os animais foram sangrados no 62o dia e os anticorpos anti-HBs obtidos foram padronizados atraves dos seguintes metodos para deteccao de antigeno HBs: a) Hemaglutinacao passiva reversa (HAPR) - utilizando-se a gamaglobulina especifica obtida de soro imune dos coelhos atraves de cromatografia de afinidade, alcancando uma concentracao otima de apenas 10 micros/ml para a sensibilizacao de hemacias de carneiro a 5%, fixadas com glutaraldeido. b) Contraimunoeletroforese (CIEF) - utilizando-se o soro imune diluido ate 1/20 como reagente para a deteccao do antigeno HBs. O soro imune anti-HBs foi tambem utilizado para a conjuncao com uma nova resina de Sepharose 4B tendo uma captacao aproximada de 0,5 a 1,0 mg de antigeno HBs por ml de resina apos completa saturacao