Comparación de técnicas in vitro para detectar resistencia de Plasmodium falciparum a medicamentos / Comparison of in vitro techniques for the detection of Plasmodium falciparum resistance to drugs

RESUMEN

Debido a que la resistencia de Plasmodium falciparum a medicamentos se percibe como uno de los problemasque más agrava la situación de la malaria en Colombia, existe la necesidad de implementar procedimientos que permitan hacer una búsqueda amplia y confiable de resistencia para establecer la prevalencia y la variación del fenómeno al nivel epidemiológico. En este trabajo se estableció la resistencia de varias cepas de referencia y algunos aislamientos de campo de P. falciparum a medicamentos como cloriquina, amodiaquina, mefloquina, quinina, halofantrina, pirimetamina y sulfadoxina. La búsqueda de resistencia se hizo a través de cuatro estrategias experimentales: una prueba modificada en nuestro laboratorio, eficaz para detectar resistencia a varios medicamentos de manera simultánea (prueba radiométrica); ensayos de PCR para detectar el polimorfismo de la región 3' del gen pfmdr1 (gen de resistencia múltiple a medicamentos de P. falciparum) asociado con resistencia a cloroquina; ensayos de PCR para detectar mutaciones en la dihidrofolato reductasa (DHFR) y en la dihidropteroato sintetasa (DHPS), relacionadas con resistencia a pirimetamina y sulfadoxina respectivamente, y una técnica modificada por nosotros para establecer resistencia a cloroquina (Rapid-test). Se estableció que el ensayo más adecuado para hacer una búsqueda de resistencia in vitro a medicamentos es el PCR. infortunadamente, aun se desconocen las bases moleculares de la resistencia a varios de los antimaláricos empleados y esto hace que la prueba radiométrica sea la mejor alternativa para detectar, a escala espidemiológica, la resistencia in vitro a cloroquina, amodiaquina, mefloquina, quinina y halofantrina