Aplicação da reação em cadeia da polimerase em estudos epidemiológicos da infecção pelo citomegalovírus humano em diferentes populações pediátricas / Evaluation of polimerase chain reaction in epidemiological studies of human cytomegalovirus infection in distinct pediatric groups

RESUMO

A implementaçao de medidas adequadas de prevençao e controle de disseminaçao de doenças infecciosas exige um conhecimento amplo de diversos aspectos epidemiológicos do microrganismo responsável pelo processo infeccioso. Essa caracterizaçao epidemiológica, por outro lado, exige a utilizaçao de técnicas e metodologias, muitas vezes específicas para cada microrganismo ou situaçao epidemiológica, que sejam capazes de agrupar isolados relacionados epidemiologicamente e diferenciar aqueles nao relacionados. Este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de uma metodologia, baseada na técnica da reaçao em cadeia da polimerase (PCR), em estudos epidemiológicos da infecçao pelo citomegalovírus (CMV). Para isso, a técnica foi desafiada em populaçoes pediátricas e situaçoes distintas, e continuamente aperfeiçoada para responder as questoes epidemiológicas necessárias para uma melhor abordagem da transmissao do CNW em crianças. No primeiro estudo a metodologia foi utilizada para caracterizaçao de cepas de CMV isoladas de pacientes pediátricos submetidos a transplante de medula óssea. Os isolados de um mesmo paciente apresentaram padroes idênticos enquanto isolados de diferentes pacientes apresentaram padroes distintos. Além de mostrar que essa populaçao geralmente excreta a mesma cepa por longos períodos e que a transmissao paciente-paciente é baixa, a técnica mostrou reprodutibilidade e poder discriminatório ao agrupar isolados relacionados epidemiologicamente e diferenciar os nao relacionados, nessa populaçao. No segundo estudo a metodologia foi aperfeiçoada para ser desafiada em uma situaçao epidemológica mais complexa. A regiao genômica do CMV estudada foi ampliada para se aumentar o poder discriminatório do método. Este estudo mostrou que membros de uma mesma família excretaram cepas idênticas, enquanto que cepas de diferentes famílias eram distintas. No terceiro estudo uma situaçao ainda mais complexa foi avaliada transmissao de uma criança para outra (horizontal) em creches. Foram avaliadas amostras seriadas de 37 crianças (dois a seis isolados por criança). O maior aperfeiçoamento da técnica permitiu demonstrar a reinfecçao por cepas distintas e a transmissao horizontal nessa populaçao. O quarto estudo envolveu uma populaçao bem maior e avaliou a diversidade genéticas de cepas excretadas por recém-nascidos (RNs) com infecçao congênita de uma determinada regiao. Os resultados obtidos sugeriram a existência de uma relaçao entre 91...(au)