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Producción de la proteína recombinante JAK2 de ratón / Production of mouse recombinant JAK2 protein
Garzón, Ruth E; flores, Amílcar; Anzola, Cecilia; Sánchez de Gómez, Myriam.
  • Garzón, Ruth E; Universidad Nacional de Colombia.
  • flores, Amílcar; Universidad Nacional de Colombia.
  • Anzola, Cecilia; Universidad Nacional de Colombia.
  • Sánchez de Gómez, Myriam; Universidad Nacional de Colombia.
Biomédica (Bogotá) ; 20(1): 10-7, mar. 2000. ilus, tab
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-278057
RESUMEN
El presente trabajo describe la producción de la proteína recombinante JAK2, empleando un sistema de vectores de expresión baculovirales. La infección de células Sf9, derivadas del tejido de ovario de Spodoptera frugiperda, permitió establecer las condiciones óptimas de dilución del virus en 10 µl/ml de medio y de tiempo de recolección en 72 horas post-infección. Se recolectaron y ultrafiltraron extractos correspondientes a la infección de 5 x 10 a la 7 células, aproximadamente, y se sometieron a cromatografía de intercambio iónico (DEAE-Sephacel), lográndose purificar parcialmente la proteína JAK2 por medio de un gradiente continuo de fuerza iónica (NaCl 10-500 mM). La presencia de JAK2 se verificó por Western blot, empleando un anticuerpo policlonal producido en conejo contra los residuos 758-776 de JAK2 de ratón. Los resultados indicaron que la proteína obtenida por este sistema de expresión se sintetiza en forma fosforilada/activada
Subject(s)
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Index: LILACS (Americas) Main subject: Receptors, Somatotropin / Recombinant Proteins Limits: Animals Language: Spanish Journal: Biomédica (Bogotá) Journal subject: Medicine Year: 2000 Type: Article Affiliation country: Colombia

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