Desarrollo de una técnica de inmunoelectrotransferencia westernblot para la detección de anticuerpos contra componentes proteínicos de Salmonella typhi / Development of an immunoelectrotransference Western blotting technic for detection of antibodies Salmonella typhi proteic particles antibodies

RESUMEN

Desde su desarrollo la inmunoelectrotransferencia (INMET) ha sido una herramienta útil en biología molecuar así como también en el diagnóstico de diferentes enfermedades infecciosas. Tradicionalmente la demostración de anticuerpos contra Salmonella typhi, se ha enfocado hacia la detección de aquellos, que se producen contra lipopolisacáridos especialmente los que se relacionan con el antígeno somático O. Pero pocos trabajos, se han realizado para la detección de anticuerpos contra otros antígenos tales como proteínas protoplasmáticas. Este trabajo intenta demostrar si tales anticuerpos se producen en conejos inmunizados experimentalmente, así como también en voluntarios vacunados contra la fiebre tifoidea con la vacuna oral (cepa T y 21a). El antígeno preparado y purificado a partir de una cepa de Salmonella typhi, fue suspendido en una solución tampón y sonificado para obtener sus productos celulares; de esta manera y con la adecuada concentración de proteínas fue separado en gel de poliacrilamida en sus diferentes fracciones antigénicas y luego transferidos a membranas de nitrocelulosa en donde por medio de reacción inmunoenzimática, se visualizó la banda característica, al poner en contacto la membrana con el antisuero hiperinmune obtenido en conejos (Modelo Experimental) y el suero de voluntarios antes y después de la inmunización (Modelo Humano). La banda visualizada correspondió a un peso aproximado de 38.000 kd. Trece de los voluntarios (32.5 por ciento), presentaron esta misma banda antes de la inmunización, la cual, aunque más tenue, representó un complejo antígeno- anticuerpo, lo cual, induce a pensar en un posible contacto con el microorganismo en el pasado. La posibilidad de la reacción cruzada se descartó realizando el mismo procedimiento con lisados de Escherichia coli