Estudio de las proteínas solubles liberadas espontáneamente por el parásito Plasmodium falciparum (exoproteínas) / Study of the soluble proteins spontaneously liberated by the parasite Plasmodium falciparum

RESUMEN

Cultivos de Plasmodium falciparum, cepa FCB1 parcialmente sincronizados con sorbitol al 5 por ciento, fueron sometidos a marcación metabólica con superíndice 35 S-metionina o con üH-isoleucina, durante todo el desarrollo intraeritrocítico. La liberación de proteínas solubles o exoproteinas marcadas con superíndice 35 S- metionina al medio de cultivo fué baja durante el desarrollo de anillos y trofozoitos maduros, aumentó durante la esquizogonia y fué máxima en el proceso de disrupción de las células rojas infectadas con esquizontes y en la reinvasión de los merozoítos. Las exoproteínas fueron obtenidas de células rojas infectadas con esquizontes, concentradas por un gradiente isopícnico de Percoll (96), en ausencia de suero, con el objeto de evitar la inteferencia de los componentes del suero, para su posterior análisis. Las exoproteínas liberadas por el parásito presentan patrones electroforéticos (SDS-PAGE) diferentes, si son obtenidas en presencia o en ausencia de eritrocitos. Se identificaron aproximadamente 35 polipétidos de Mr entre 200.000 y 19.000. Tres polipéptidos de Mr 77.000, 48.000 y 36.000 están presentes en el sobrenadante del cultivo cuando el merozoíto invade nuevos eritrocitos. Estas proteínas podrían estar asociadas a la cubierta celular del merozoíto, ya que se ha demostrado por microscopía electrónica que esta es dejada por el parásito cuando invade (20,21). Estas exoproteínas están ausentes en el medio de cultivo cuando el merozoíto no invade. Cuatro polipéptidos de Mr 153.000, 86.000, 65.800 y 65.000 fueron identificados solo cuando las exoproteínas fueron obtenidas en ausencia de eritrocitos (no ocurre invasión) y están ausentes en exoproteínas obtenidas en presencia de eritrocitos. Esto parece sugerir que se adhiere al eritrocito y se pierde en el proceso de invasión. Incubando exoproteínas obtenidas en ausencia de eritrocitos con eritrocitos no infectados a concentraciones de 0.5 x 10 superíndice 6 células rojas/ml se observó la desaparición de bandas del patrón electroforético (SDS-PAGE) de Mr 153.000, 139.000, 136.000, 86.000 y 65.000 con respecto al patrón en ausencia de eritrocitos, confirmando nuevamente aquellas proteínas que se pierden en el proceso de invasión. Aún no se ha demostrado la especificidad de la unión de estas proteínas por la membrana del eritrocito. Por medio de inmunoprecipitaciones de las exoproteínas con sueros de pacientes parcialmente...