Proteínas de unión a actina en Plasmodium falciparum

RESUMEN

La invasión del Plasmodium falciparaum, el agente causante de la malaria en humanos, implica un movimiento de penetración del parásito a los eritrocitos. Con el objetivo de determinar proteínas de unión a actina, se utilizaron dos estrategias diferentes la primera consistió en preparar columnas de afinidad con actina polimerizada (actina F), para cromatografiar extractos de parásito marcados radioactivamente con L-[Superíndice 35S] metionina, y seleccionar proteínas de unión a actina que posteriormente, fueron identificadas por medio de anticuerpos específicos. En la segunda se utilizó la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) y oligonucleótidos generados, diseñados con base en secuencias consenso de miosinas, para buscar un fragmento de este gen en el ADN genómico (ADNg) del parásito y posteriormente clonarlo y secuenciarlo. Los resultados obtenidos sugieren la existencia de un motor molecular basado en actina-miosina, en la invasión del parásito a los eritrocitos. Esta afirmación esta sustentanda en primer lugar por el hallazgo de un gen de miosina en P. falciparum, que por homología de su secuencia parcial se clasifica dentro de la clase I de las miosinas no convencionales, caracterizadas por su capacidad de generar movimientos sobre filamentos de actina en diferentes células. Adicionalmente por medio de Western Blot y anticuerpos específicos, anti alfa actina, tripomiosina, espectrina, miosina y actina se determinó la exitencia de estas proteínas en el parásito