Incremento en la produccion de colagenasa en incubado de sinoviocitos de pacientes com artritis reumatoidea y osteoartrosis / Collagenase production increases in rheumatoid arthritis and ostheoarthritis synoviocytes incubated

RESUMEN

El cartílago articular es un tejido paucicelular, con colágeno y proteoglicanos en la matriz extracelular. Su degradación es función de los sinoviocitos, que segregan metaloproteasas que catabolizan a los proteoglicanos. Se distinguen los sinoviocitos A o macrofágicos y los sinoviocitos B o fibroblásticos. La destrucción de proteoglicanos puede ser LT- dependiente o independiente. Nuestro objetivo fue estudiar ex vívo el rol de los sinoviocitos, sin la influencia del sistema inmune. Líquido sinovial de pacientes de ambos sexos, 70ñ2años, con OA(6) y AR(6), vírgenes de tratamiento, se centrifugó 30 minutos a 1500 g, para aislar sinoviocitos. El sedimento se incubó 6 hs en medio Dulbecco-Eagles, con 26 mM de HEPES Gibco, NaHCO3 ( 0.5g/l), glutamina (2 mM), estreptomicina (100mg/l), penicilina (1 U/ml) y anfotericina B (2.5mg/l). Identidad y viabilidad celulares se determinaron con técnicas citopatológicas. Las muestras control provinieron de artritis traumática o patología osteoarticular no-inflamatoria. Con anticuerpos monoclonales anti-MMPs(10mg/ml), previo bloqueo de producción de proteínas inespecíficas con albúmina sérica bovina, se midió actividad colagenasa (MMP-1) antes y después de incubar con ELISA-doble-sandwich. Con streptavidin-peroxidasa se desarrolló color y por absorbancia a 410 nm, se leyó la complejación de los anticuerpos marcados. La secreción de MMP-1 por sinovio-citos AR fue 1373ñ115 ng/ml. Con 6 hs de incubado aumentó hasta 2143ñ132ng/l (-56 por ciento)(p<0.0001), probablemente por la hipercelularidad. Los sinoviocitos OA secretaron 276 ñ 23 ng/ml , y 542 ñ 47 ng/ml tras la incubación (96 por ciente)(p<0.001). Hay paralelismo entre la producción de MMP-1 y la observación microscópica. Sinoviocitos con abundante citoplasma corresponden a altos niveles de enzima. La baja secreción de MMPs responde a escasa población celular y núcleos picnóticos. Aunque en AR la producción de MMPs fue 4.6 veces mayor que en OA, en cambio el incremento porcentual tras la incubación fue casi el doble en OA que en AR. Esos resultados confirman que la producción enzimática varía con la inflamación, que es mayor en los procesos agudos, y que la incubación de sinoviocitos permite detectar cambios patológicos locales