Sources of errors in the quantitative analysis of food carotenoids by HPLC

RESUMEN

Varios factores hacen inherentemente difícil la determinación de carotenoides. A pesar de los avances en la instrumentación analítica, se pueden encontrar en la literatura internacional, discrepancias en los resultados cuantitativos relacionados a los carotenoides. Una gran parte de los errores provienen de las etapas precromatográficas tales como: esquema de muestreo que produce muestra representativa del lote en estudio; preparación de muestra que no mantenga la representatividad y garantice la homogeneidad de la muestra analítica; extracción incompleta; pérdidas físicas de los carotenoides durante las varias etapas, especialmente durante la partición o lavado y por absorción en las paredes de vidrios de los recipientes; isomerización y oxidación de los carotenoides durante el análisis. Sin embargo, a pesar de que actualmente el método escogido para análisis de carotenoides es HPLC, éste está sujeto a varias fuentes de errores, tales como: incompatibilidad del solvente de inyección y la fase móvil, resultando en picos distorsionados o divididos; identificación errónea; indisponibilidad, impureza e inestabilidad de los patrones de carotenoides; cuantificación de picos altamente superpuestos; baja recuperación de las columnas de HPLC; errores en la preparación de las soluciones de patrones y en el procedimiento de calibración; errores de cálculo. Se presentan ilustraciones de los posibles errores en la cuantificación de carotenoides por HPLC