Desenvolvimento e validaçäo de um método imunofluorométrico para a pesquisa de anticorpos antiperoxidase tiroidiana no soro / Development and validation of an immunofluorometric assay for serum thyroid anti-peroxydase antibodies

RESUMO

Desenvolvemos um ensaio onde TPO altamente purificada, obtida a partir de tecido humano, é adsorvida em poços de placas de microtitulaçäo; após incubaçäo com os soros a serem estudados, a revelaçäo da presença de anticorpos específicos é feita com o emprego de anticorpo monoclonal anti-IgG humana marcado com európio. A sensibilidade do teste é da ordem de 0,6U/mL, e as características de reprodutibilidade bastante aceitáveis. Foram analisadas amostras de soro de 188 indivíduos normais de ambos os sexos (74 com >65 anos), de 54 pacientes com doença de Graves (DG) e de 13 com tiroidite de Hashimoto (TH). O método foi comparado, com base em 97 amostras, com um RIE comercial, encontrando-se alta concordância com índice kappa de 0,959. O estudo do valor de corte para definir a presença de anticorpos anti-TPO em níveis significativos baseou-se na curva ROC, e foi fixado em l0U/mL. A freqüência de anti-TPO positivo na populaçäo normal foi de 9,6 por cento em indivíduos até 64 anos e de 16,5 por cento nos com >65 anos; nos pacientes com DG 85,2 por cento apresentaram anti-TPO positivo, sendo 100 por cento nos pacientes com TH. O ensaio descrito mostrou-se sensível e específico e de fácil execuçäo para a detecçäo de autoanticorpos contra a peroxidase tiroidiana presentes na maioria dos indivíduos com doença auto-imune tiroidiana.