Desarrollo de cartílago fetal ùin vivoùutilizando técnicas de ingeniería tisular / ùIn vivoùfetal cartilage development using tissue engineering techniques

RESUMEN

La ingeniería tisular es el área científica interdisciplinaria cuyo fundamento esencial es el uso de células vivas,manipulación del entorno extracelular,creación de sustitutos biológicos y su consecuente implante en el cuerpo.El objetivo del presente estudio es desarrollar cartílago fetal en un modelo ùin vivoùcon el propósito de evaluar e interpretar el comportamiento celular fetal y su capacidad de formación de un tejido determinado.Mediante fetoscopía se obtuvieron células de pabellón auricular de fetos de ovejas de 90 a 95 días de gestación,el tejido obtenido fue disecado hasta obtener tejido cartilaginoso puro,luego fue tratado y sembrado en platos de cultivo y las células fueron expandidas cada 72 horas hasta obtener la cantidad necesaria para realizar el experimento.Las células expandidas fueron sembradas en un polímero de ácido poliglicólico de 1 cm x 1 cm de lado y luego implantadas en ratones atímicos(sin capacidad de respuesta inmune)en el tejido celular subcutáneo en 4 diferentes concentraciones celulares.En otro grupo de animales se implantó el polímero sin células a modo de control.Los animales fueron sacrificados a las 2,4,6,8 y 12 semanas del implante.Los tejidos obtenidos evaluados histologicamente utilizando hematoxilina-eosina,azul de alcian,azul de toluidina,tricómico de Masson y safranina ùoù.Todos los animales toleraron el procedimiento quirúrgico y sobrevivieron hasta el momento estipulado de sacrificio.Al exámen microscópico todos los polímeros sembrados desarrollaron tejido con estructura cartilaginosa que mostró mayor consistencia en los espécimenes sacrificados mas tardíamente,El tamaño del cartílago fetal tuvo una relación directa con el volumen de células implantadas.El polímero fue degrándándose paulatinamente con el correr de las semanas no quedando restos del mismo hacia el final de la sexta semana.Ningún polímero solo,es decir sin células,fue capaz de formar tejido.Concluímos que el mayor volumen de células sembradas,el tiempo más prolongado y un apoyo nutricional adecuado son factores que mejoran la formación ùin vivoùde cartílado fetal