Sexagem de embriöes bovinos fecundados in vitro pela técnica de PCR multiplex / Sexing of in vitro fertilized bovine embryos by multiplex PCR
Braz. j. vet. res. anim. sci
;
37(6): 453-456, dez. 2000. ilus
Article
in Portuguese
| LILACS
| ID: lil-327447
RESUMO
Neste trabalho, a técnica de PCR ("polymerase chain reaction") foi utilizada para a sexagem de 92 embriöes bovinos fertilizados in vitro. Os embriöes originaram-se de fertilizaçäo in vitro de oócitos aspirados de ovários de fêmeas bovinas, provenientes de abatedouros comerciais. Os oócitos foram maturados, fertilizados e cultivados até o estádio de blastocisto. Os embriöes foram lavados em soluçäo de PBS, transferidos para tubos de polipropileno contendo água ultrapura, e imediatamente congelados a -196§C. Os embriöes foram descongelados sobre isopor contendo gelo picado e tratados com proteinase K. Para a reaçäo de PCR, utilizaram-se alíquotas de 34 µl de cada tudo, onde foram acrescidos dois pares de primers, seqüência BC1.2 e seqüência satélite 1.715, desoxinucleotídeos, MgCl2, tampao PCR 10X, TaqDNA polimerase e água, em um volume final de 50 µl. As amostras foram amplificadas e a eletroforese realizada em gel de poliacrilamida a 8 por cento. Os géis foram corados com soluçäo de brometo de etídio e analisados em transiluminador de luz ultravioleta. Um índice de 93,47 por cento de amplificaçäo foi atingido, com 41 embriöes (47,67 por cento) machos e 45 (52,32 por cento) embriöes fêmeas. O uso de gel de poliacrilamida a 8 por cento foi eficaz na separaçäo de fragmentos de DNA muito próximos
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Cattle
/
Fertilization in Vitro
/
Polymerase Chain Reaction
/
Embryonic Structures
Limits:
Animals
Language:
Portuguese
Journal:
Braz. j. vet. res. anim. sci
Journal subject:
Veterinary Medicine
Year:
2000
Type:
Article
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
Universidade Estadual Paulista/BR
/
Universidade de Säo Paulo/BR
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