Adiçäo de íon magnésio, potássio e vitaminas visando ao meio de cultura para a produçäo de enterotoxina estafilocócica A / Addition of magnesium, potassium ion and vitamins in culture media for staphylococcal enterotoxin A production

RESUMO

Staphylococcus aureus é um patógeno freqüentemente envolvido em surtos de intoxicaçäo alimentar. A detecçäo rápida e eficaz da toxina é fundamental para o diagnóstico e tratamento da doença. Com o objetivo de produzir enterotoxina estafilocócica A (EEA), destinada à produçäo de reagentes imunológicos, testaram-se 21 formulaçöes baseadas em hidrolisado de caseína (peptona, triptona e casitona) adicionadas de tiamina, niacina, Mg²+, K+ e/ou extrato de levedura. Os meios inoculados de S. aureus linhagem 722 foram incubados a 37ºC (220 rpm, 24 horas) e os sobrenadantes (10.000 g. 15 min a 4ºC) testados quanto à produçäo de EEA (RPLA, aglutinaçäo de látex) e exoproteínas totais (método de Bradford). A melhor produçäo de toxina (92,6 µg/mL de EEA) foi obtida no meio com triptona adicionada de tiamina e niacina, seguida de triptona adicionada de extrato de levedura e K+ (87 µg/mL). A combinaçäo tiamina + niacina + Mg²+ reduziu a produçäo de EEA, em relaçäo ao meio básico triptona ou peptona. O extrato de levedura com triptona aumentou a produçäo de EEA (59,6 µg/mL), porém em menor grau do que a combinaçäo niacina + tiamina (92,6 µg/mL). Considerando o seu menor custo em relaçäo à tiamina e à niacina, elegeu-se a triptona de caseína 3 por cento acrescida de 1 por cento de extrato de levedura para a produçäo de EEA, visando à purificaçäo. O trabalho atingiu o objetivo proposto e pode contribuir para incrementar a difusäo de método imunológico, com a possibilidade de atender ao controle de qualidade na condiçäo nacional.