Extraçäo rápida de DNA para uso no diagnóstico histopatológico e estudos retrospectivos: comparaçäo de quatro métodos / Rapid DNA extraction for histopathologic diagnosis and retrospective studies: comparison between four methods

RESUMO

A análise do DNA extraído de espécimes de arquivo utilizando-se a reaçäo em cadeia da polimerase (PCR) representa a base de uma variedade de pesquisas e protocolos de diagnóstico. A escolha de um método de extraçäo ótimo é crítica para o sucesso do procedimento. Nós avaliamos quatro métodos de extraçäo rápida de DNA para verificar qual o protocolo mais apropriado para amostras processadas rotineiramente e embebidas em parafina digestäo enzimática e fervura, ambos com e sem desparafinizaçäo prévia em xilol. O DNA extraído das amostras foi quantificado em espectrofotômetro. O DNA foi amplificado pela técnica da PCR utilizando-se "primers" para éxon 7 da citoqueratina humana tipo 14 e o éxon 8 do gene p53 humano. DNA foi obtido através de todos os métodos de extraçäo utilizados. Apenas o DNA extraído com digestäo enzimática, com e sem desparafinizaçäo prévia, foi amplificado com sucesso pela PCR. Essas duas técnicas produzem métodos rápidos e reproduzíveis de obtençäo de DNA de tecidos arquivados em blocos de parafina, para ajudar no diagnóstico histopatológico e para realizar estudos retrospectivos