In vitro induction of human polymorphonuclear leuckocyte damage by junin virus

RESUMEN

Diferentes modelos experimentales, utilizando cepas patógenas de virus Junín (VJ), han reproducido la característica leucopenia con que cursa la enfermedad humana. Los mecanismos responsables de esta leucopenia son poco conocidos. Con el fin de indagar si el VJ posee algún efecto citopatógeno directo sobre leucocitos polimorfonucleares (PMN), se incubó una suspensión de PMN humanos con VJ, cepa XJCl3. Las células se obtuvieron de doadores sanos de banco de sangre y fueron separados en gradientes de Ficoll Hypaque, lográndose 98% de pureza. Se obtuvieron muestras secuenciales del sobrenadante y de las células para determinación de actividad enzimática (peroxidasa, betaglucuronidasa y lisozina), titulación de VJ y estudios morfológicos con microscopía de luz y electrónica. Se observó una pérdida gradual y constante de las granulaciones citoplásmicas entre las 2 y 10 horas post-infección (pi) disminución del número de células viables según prueba de exclusión de azul tripan, entre las 10 y 20 horas pi y un aumento de la concentración de enzimas lisosomales en el sobrenadante a partir de las 10h pi. Aparentemente no hubo replicación viral ya que luego de las 11h pi no pudo rescatarse infectividad por medio de técnicas convencionales. Para la producción de estos efectos, el virus necesita poseer su capacidad infectante intacta ya que el tratamiento previo con irradiación ultravioleta o con suero inmune anti-VJ previene cambios. Estas observaciones indican que el virus Junín infectante induce alteraciones tempranas irreversibles sobre los PMN