Determinación de la producción de interleucina-1B al estímulo mecánico en osteoblastos humanos cultivados "in vitro" / Determination of the interleukin-1B production by mechanical stimulation in cultured human osteoblastos, in vitro

RESUMEN

La remodelación mecánica del hueso es utilizada por los ortodoncistas, quienes ejercen fuerza sobre los dientes para moverlos a través del hueso alveolar; tal remodelación ósea involucra la activación de las células del hueso y la estimulación de la reabsorción y aposición de la matriz ósea. La estimulacion mecánica ha sido reconocida como un factor importante en la remodelación ósea, especialmente durante la erupción de los dientes, en la corrección de las maloclusiones, sin embargo, los aspectos moleculares que se involucran en estos procesos no han sido totalmente entendidos. Se han desarrollado diferentes métodos para aplicar el estímulo mecánico al tejido óseo, in vivo o in vitro, a células humanas, para evaluar el resultado bioquímico. El objetivo de este trabajo fue analizar los efectos de la estimulación mecánica en osteoblastos humanos (Saos-2) cultivados in vitro, con respecto a la producción de interleucina 1 Beta (IL-1B), uno de los pasos involucrados en el proceso de remodelación ósea. En este estudio se desarrolló un método de crecer osteoblastos humanos como línea celular en cajas Petri, donde la base puede ser deformada intermitentemente cada 5 segundos después de 1.5 minutos durante más de 72 horas. La estimulación mcánica de estas células se compara con células no estimuladas (n=5). Los osteoblastos humanos son sembrados para ser confluentes en un medio de cultivo F12 de Dulbeco modificado con un 10 por ciento de suero fetal, 100 ug/mL de estreptomicina, 100U/mL de penicilina y 0.25 ug/mL de anfotericina, en una atmósfera de 95 por ciento de aire y un 5 por ciento de CO2, a 37§C. Utilizando el ensayo de ELISA (Enzyme-linked Immunoassay) se determinó los niveles de producción de IL-1B después de 8, 24, 48 y 72 horas. Los resultados mostraron que no hubo producción de IL-1B después de 8, 24, 48 y 72 horas. Los resultados mostraron que no hubo producción de IL-1B a las 8 horas de estímulo, sin embargo a las 24 (13.5 +- 2.1), 48 (23.2 +- 1.3) y 72 horas (33.9 +- 1.9) se encontró una diferencia estadísticamente significativa comparada con el control (p<0.0001). Estos resultados sugirieron que los osteoblastos humanos cutivados in vitro reaccionan al estímulo mecánico liberando mayor cantidad de IL-1B en comparación con el control y de alguna manera algunos efectos celulares pueden asociarse con la remodelación ósea y el movimiento dentario durante el tratamiento de ortodoncia