Determinação amperométrica de polifenóis em urina humana, usando extrato bruto de banana nanica musa acuminata / Amperometric detarmination of polyphenols in human urine, utilizing crude extract of stunded banana (Musa acuminata)

RESUMO

Introdução - Extrato bruto da fruta banana nanica (Musa acumínata); melhor fonte de enzima Polifenoi oxidase (PFO) [EC. 1. 14.18. 11 (Perone, 2000), foi estudado como material biocatalítico para a oxidação aeróbica dos substratos fenólicos usando um biossensor amperométrico com PFO imobilizada. Métodos - Foi estudada a extração da PFO dessa fonte através da centrifugação do material biocatalítico em tampão fosfato 0,1 moi/L e pH 6,5, com 5,Og do polímero policiar SB-100 (Perone, 2000). Esse polímero foi utilizado para a remoção de compostos fenólicos presentes em excesso nesse extrato. A seguir, a atividade da enzima PFO e proteína total nesse extrato foi determinada. Um biossensor amperométrico foi construido usando 100 U de PFO proveniente do extrato bruto de banana nanica; imobilizada sobre uma membrana de tefion (Celgard 2400) com o uso do reagente bifuncional glutaraldeído 2,5 por cento m/V. Após secagem, esta membrana enzimática foi acoplada na extremidade de um eletrodo de oxigênio com o auxílio de um anel de borracha. Esse biossensor foi usado na determinação de compostos fenólicos em amostras de urina de indivíduos que trabalham com esses compostos e seus derivados, por amperometria (método proposto) e por espectrofotometria (método padrão). Resultados - Indivíduos que trabalham diariamente com esses compostos em indústrias de tintas e derivados apresentam maior quantidade de fenóis na urina do que aqueles que trabalham periodicamente. Conclusões - A porcentagem de erro nas amostras estudadas foi menor que 3 por cento; comparado com o método padrão espectrofotométrico de determinação de fenóis totais (Folin-Denis), mostrando a eficiência do método amperométrico empregado.