Avaliação da proliferação linfocitária e sensibilidade a glicocorticóides por ensaios colorimétricos / Evaluation of lymphocyte proliferation ans sensitivity to glucocorticoids by colorimetric assays

RESUMO

Objetivos: Padronizar de um ensaio colorimétrico quantitativo para avaliação da proliferação linfocitária humana e sensibilidade a glicocorticóides IN VITRO. Material e Métodos: Sangue periférico foi coletado de adultos saudáveis, células mononucleares foram isoladas por um gradiente de densidade e cultivadas por 36 H (a 37 graus e 5 por cento de gás carbônico) na prsença de fitohemaglutinina (PHA), mitógeno de células T, e glicocorticóides (dexametasona, cortisol e metilprenisolona). O presente estudo apresenta a padronização da etapa de revelação desses ensaios, utilizando o sal de tetrazólio (MTT; 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil brometo tetrazólico) como marcador. Resulatdos A padronização do ensaio de proliferação estabeleceu as seguintes condições ótimas de cultura 1,5x10na quinta células/poço, 5mg/mL de MTT e 1 por cento de PHA. Todos os glicocorticóides testados apresentram um efeito supressor dose-dependente da proliferação, com máxima supressão a 10 na quinta negativo M. Conclusões: As principais vantagens do ensaio colorimétrico são sua rapidez, precisão e dispensabilidade de radioisótopos. Esses ensaios estão sendo utilizados para a avliação da imunidade celular nos idosos bem como em pacientes com câncer e doenças respiratórias.