Isolamento e propagação da Ehrlichia canis em células DH82 e obtenção de antígeno para a reação de imunofluorescência indireta / Isolation and propagation of Ehrlichia canis in DH82 cells as a source of antigens in indirect immunofluorescence test

RESUMO

Ehrlichia canis, agente etiológico da Ehrlichiose Monocítica Canina, foi obtida a partir de um cão naturalmente infectado e propagada em outro por infecção experimental. A camada de mononucleares deste animal foi separada e inoculada em células macrofágicas de linhagem contínua de origem canina, denominadas DH82. A cultura apresentou-se positiva 18 dias pós a infecção. A propagação da Ehrlichia canis in vitro foi acompanhada a partir da observação de mórulas nas células presentes no sobrenadante da cultura infectada, pelas técnicas de citocentrifugação, inoculação em tubos de Leighton e imunofluorescência direta. O cultivo apresentou cerca de 30 por cento de infecção após 30º dia, alcançando 80 por cento no 47º, sendo então dividido a 1:2. As células DH82 permitiram o isolamento de E. canis e foram utilizadas como fonte de antígeno para o teste de imunofluorescência indireta.