Obtención y caracterización inmunoquímica de una IgY anti-porphyromonas gingivalis / Immunochemical and characterization of a IgY Anti-gingival porphyromonas

RESUMEN

El objetivo principal de este trabajo fue la producción y caraterización inmunoquímica de anticuerpos policlonales aviares dirigidos contra porphyromonas gingivalis (P.g). La bacteria fue cultivada en ambiente de anaerobiosis, se homogenizó y se realizaron electroforesis denaturantes para conocer su perfil. Con el homogenizado se inmunizaron dos gallinas Leghorn y se hizo la recolección de los huevos, tanto pre-inmunes, como a los 5 días de terminado el esquema de inmunización. Fueron determinadas las concentraciones de inmunoglobulina presentes, su peso molecular y la pureza del purificado mediante electroforesis no denaturante. Se realizaron pruebas con las diluciones mínimas de trabajo del homogenizado bacteriano (Antígeno), del anticuerpo anti P.g. y del conjugado anti IgY en Dot blot y finalmente un Western blot proporcionó información acerca de la sensibilidad de los complejos formados por proteínas reconocidas por los anticuerpos. Los resultados evidenciaron en primera instancia un alto rendimiento en el proceso de purificación de la IgY y adicionalmente un reconocimiento de alta especificidad y sensibilidad tanto en el Dot blot como en el Western blot, demostrando las grandes ventajas de usar modelos diferentes a los de mamíferos para la obtención de anticuerpos para la investigación, diagnóstico y terapéutica.