Obtenção de macrófagos ativados para trabalhos científicos / Obtaining activated macrophages for scientific use

RESUMO

O estudo em célula tem sido sempre um grande desafio em qualquer nível da ciência. O surgimento da cultura celular in vitro veio na tentativa de minimizar as dificuldades inerentes ao estudo in vivo. Sabendo disso, seria de importância estudar qual a maneira mais prática de obtenção da célula escolhida antes do início de qualquer pesquisa na área celular. Com interesse de trabalhar com a inflamação crônica escolheu-se os macrófagos, células predominantes desse processo. O objetivo deste estudo foi testar uma metodologia de obtenção e manutenção dessas células, como um estudo piloto e de treinamento da técnica, para serem usados em experimentos científicos de dissertações e teses. Métodos - Seis camundongos receberam injeção intraperitoneal de 2 ml e meio tioglicolato a 5 por cento e após cinco ou sete dias foram sacrificados e receberam injeção intraperitoneal de 5 ml de solução tampão fosfato-salina (PBSA). Após massagem na cavidade abdominal o exsudato peritoneal induzido foi recuperado por aspiração, transferido para tubos de ensaio e centrifugados a 300 g, por dez minutos. As suspensões celulares em meio de Eagle modificado por Dulbecco (DME) foram identificadas através da coloração de May-Grünwald e Giemsa modificada por Rosenfeld e semeadas em frascos e mantidas em estufa a 37o C, com atmosfera úmida contendo 5 por cento de CO2. Resultados - Foram encontrados somente macrófagos após dezoito horas do plaqueamento. Conclusões - Conclui-se que com essa metodologia é possível a obtenção simples e rápida de população de macrófagos que poderão ser utilizados para análise em pesquisas e que a prática é fundamental para evitar perdas de amostras desnecessárias