Cultivo primario e inmortalización de células de paratiroides para trasplante celular, en hipoparatiroidismo quirúrgico / Primary culture and immortalization of parathyroid cells for cell transplantation, in surgical hypoparathyroidism

RESUMEN

El hipoparatiroidismo permanente ocurre después de tireidectomía (0,2-4 por ciento) o de cirugía paratiroidea. Lamentablemente el autotransplante no es 100 por ciento efectivo para prevención, y los pacientes deben recibir suplementación de vitamina D y calcio de por vida, con un costoso y a veces difícil manejo médico. Poca experiencia hay a nivel mundial de alotrasplantes paratiroideos en humanos. Un grupo de investigadores logró un período de sobrevida del injerto de 1 año en 8 pacientes, pero sin consignar los requerimientos de calcio y vitamina D. La dificultad de esta terapia es el rechazo por aloinmunización, y el establecimiento de cultivos primarios duraderos que permita conseguir una masa de células suficiente para el trasplante. Se ha logrado mantener cultivos, y función endocrina de ellos, por 60 días máximo. Nuestro objetivo es modificar y optimizar los cultivos primarios de paratiroides humana para a)Obtener una línea continua de células paratiroideas, b)caracterizar la línea en cuanto a función endocrina, y c)disminuir la antigenicidad, como fuente futura de trasplante celular. La serie presentada incluye 5 pacientes intervenidas quirúrgicamente por hiperparatiroidismo primario, con diagnóstico definitivo de adenoma paratiroideo. Las muestras fueron sometidas a digestión enzimática y disgregación mecánica, cultivándose finalmente en placas de Petri a 37 °C. Resultados: Todos los cultivos primario fueron efectivos, con morfología típica a la microscopia. El primer cultivo creció y produjo PTH, pero no sobrevivió a contaminación del medio de cultivo. Los otros 4 están aún en período de expansión (crecimiento y multiplicación) con 150,60,40 y 35 días de cultivo. La función endocrina de las células en cultivo fue estudiada midiendo PTH en el medio de cultivo. Se obtuvo una producción promedio de 521,6 pg/ml en 24 horas (224-730 pg/ml). Todos los cultivos fueron positivos para esta medición.