Otimização da determinação de aflatoxina M1 em leite por coluna de imunoafinidade, cromatografia em camada delgada e sua ocorrência / Performance of determination for aflatoxin M1 in milk by immunoafinity column and thin layer chromatography

RESUMO

Um método utilizando coluna de imunoafinidade para limpeza e cromatografia em camada delgada, foi otimizado em nosso laboratório para determinar Aflatoxina M1 em baixas concentrações no leite. Para a otimização do método, os parâmetros avaliados foram recuperação, repetividade, limite de detecção e limite de quantificação. Baseado em adição de padrão nas amostras, os valores das recuperações variaram de 85,83% e 73,86% em níveis de 0,01-0,5 mg/L, respectivamente, e o desvio padrão relativo para repetitividade variou de 7,73-2,08%. O limite de quantificação foi de 0,02 mg/L. Cento e sete amostras de leite pasteurizado, UHT e crú, comercializados nas cidades de Marília e São Paulo foram analisadas utilizando este método. A aflatoxina M1, foi detectada em 79 (73,8%) amostras, variando de 0,02-0,2mg/L. Os resultados das amostras analisadas por este método tiveram boa correlação quando comparadas com a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Adicionalmente, o método AOAC (1975) também foi otimizado, resultando em um limite de detecção e quantificação de 0,2 e 0,3 mg/L, respectivamente. Em 36 amostras de leite pasteurizado analisadas, foi detectada aflatoxina em 1(2,7%) amostra, indicando baixa sensibilidade desse método. Concluindo, a utilização de coluna de imunoafinidade fornece resultados na recuperação, sensibilidade e apresenta fácil operacionalidade. Apesar da alta incidência de aflatoxina M1, em amostras em ambas as cidades, o nível de contaminação pode não ser considerado um sério problema de saúde pública, de acordo com a legislação brasileira.