Ouabain exacerbates activation-induced cell death in human peripheral blood lymphocytes

RESUMO

Quando linfócitos são ativados por lectinas mitogênicas apresentam mudanças do potencial de membrana, elevação das concentrações citoplasmáticas de cálcio, proliferação e/ou morte celular induzida por ativação (AICD). Concentrações baixas de ouabaína (um inibidor da Na,K-ATPase) suprimem a proliferação induzida por mitógenos e aumentam a morte celular. Para entender os mecanismos envolvidos, uma série de parâmetros foram avaliados usando sondas fluorescentes e citometria de fluxo. A adição de 100nM de ouabaína para culturas de linfócitos de sangue periférico ativadas por fitohemaglutinina (PHA) não modificou o aumento de expressão do receptor Fas ou de seu ligante FasL induzida pelo mitógeno. No entanto, o tratamento com ouabaína potenciou a apoptose induzida por um anticorpo anti-Fas funcionando como agonista. Um sinergismo entre ouabaína e PHA também foi observado com relação à despolarização da membrana plasmática. Com relação à membrana mitocondrial, PHA por si só não produziu despolarização, mas quando as células foram também expostas à ouabaina uma dissipação do potencial foi observado, mas isso foi um evento tardio. É possível que o efeito inibitório da ouabaína em linfócitos de sangue periférico ativados envolva a potencialização de alguns aspectos do processo apoptótico e reflita uma exacerbação do mecanismo de AICD.