Efectos de las variaciones de Ca²+ intracelular sobre el cotransporte de Na/K/2CI en células aisladas del epitelio ciliar de ojos de conejo / Effect of intracellular Ca²+ variations cotransporter Na/K/2CI in ciliary epithelial cells from rabbit eyes

RESUMEN

Evaluar el efecto de las variaciones de Ca+² intracelular sobre los mecanismos de transporte activo de iones responsables de la secreción de humor acuoso en células aisladas del epitelio ciliar de ojos de conejo. Se aislaron células de epitelio ciliar de ojos de conejo (técnica de Riley y Kishiba) en las cuales se evaluó el efecto de EGTA (quelante de Ca²+ intracelular) e ionomicina (ionóforo, de Ca²+ sobre la actividades del la ATPasa de Na/K (captación de 86Rb sensible a ouabaina) y el contransporte de Na/K/2CI (captación de 86Rb sensible a bumetanida). La radioactividad fue determinada a través de centello líquido y la actividad de los mecanismos de transporte expresada en modelos de 86Rb / mg.proteína.min. El BAPTA-AM 50µM produjo una inhibición significativa de la actividad del cotransporte de Na/K/2CI en relación al control (n=8 110±7 Vs. 25±2 P= 0,0001), mientras que la ATPasa de Na/K no fue aceptada (n=8 210±9 vs. 204± 8). La ionomicina 10 µM produjo una estimulación de la actividad del contransporte de Na/K 2CI en relación al control (n=8 100±6 Vs. 171±13, P= 0,0002), mientras que la ATPasa de Na/K no fue afectada (218±11 Vs. 200±14). El EGTA 3 mM no afecto ni la ATPasa de Na/K (n=8 242±16 Vs. 250±14) ni al contransporte de Na/K2CI (n=8 122±18 Vs. 11 7±5). Nuestros resultados indican que el Ca² intracelular posiblemente actúa como regulador de la producción de humor acuoso a través de sus efectos sobre el cotransporte de Na/K2CI presente en las células del epitelio ciliar