Mecanismo de interferência do ácido ascórbico em ensaios bioquímicos baseados no sistema oxidase/peroxidase (reação de Trinder) / Mechanism of ascorbic acid interference in biochemical tests using peroxide and peroxidase to generate chromophore (Trinder's reaction)

RESUMO

Para esclarecer o mecanismo da interferência do ácido ascórbico na reação de Trinder estudamos as cinéticas de formação e de redução dos cromógenos oxidados, resultantes da reação entre o H2O2, o composto fenólico e a 4-aminofenazona nos ensaios de ácido úrico, colesterol, triglicérides e glicose. Verificamos, também o efeito dos constituintes da reação de Trinder na interferência pelo ácido ascórbico. O ácido ascórbico inibiu todas as reações estudadas, seguindo uma estequiometria de 11 com os analitos. O ácido ascórbico diminuiu a quantidade do cremógeno formado na reação do ácido úrico sem alterar a cinética de formação, enquanto que para o colesterol, triglicérides e glicose houve aumento da fase "lag". No entanto, o ácido ascórbico não inibiu a enzima oxidase. A adição de H2O2 aos reagentes não apresentou fase "lag" na presença de ácido ascórbico. Além disso, o ácido ascórbico não reduziu expressivamente os cromógenos formados. Concluímos que o consumo do H2O2 foi o mecanismo predominante da interferência do ácido ascórbico na reação de Trinder. O efeito na cinética de formação dos cromógenos deve-se, possivelmente, à velocidade de geração do H2O2 pelas oxidases específicas.