Resposta in vitro de células gliossarcoma 9L após terapia fotodinâmica utilizando imagem de bioluminescência / In vitro gliosarcoma 9L cells response after photodynamic therapy using bioluminescence imaging

RESUMO

Objetivos: O presente estudo tem o objetivo de demonstrar os resultados iniciais da utilização da técnica deimagem de bioluminescência como método de monitoramento do tratamento de células de gliossarcoma de rato 9L após Terapia Fotodinâmica (TFD) utilizando o ácido aminolevulínico (ALA) como agente fotossensibilizante. Métodos: Para o presente estudo, células 9L foram transfectadas com um plasmídeo contendo o gene da luciferase, permitindo que essa linhagem celular produzisse a proteína luciferase, um dos substratos necessários para a reação de bioluminescência. No presente estudo, a TFD foi realizada utilizando diferentes doses de luz e de ácido aminolevulínico. Para validar a técnica de imagem de bioluminescência como método para o monitoramento da resposta de células tumorais e para a verificação da correlação entre o sinal luminoso e o grau de morte celular após TFD, foi utilizado o ensaio de viabilidade celular com Sulforodamina B (SRB). Resultados: Os resultados destetrabalho mostram alta correlação entre o número de células e o sinal de bioluminescência (R2 = 0,996). Os ensaios de viabilidade celular utilizando a técnica SRB, mostraram excelente correlação entre o número relativo de células sobreviventes após TFD e o sinal de bioluminescência, mostrando que a técnica de imagem de bioluminescência pode ser utilizada para o monitoramento da resposta tumoral após o tratamento de células tumorais com TFD. Os resultados do tratamento das células com terapia fotodinâmica mostram que a taxa de indução de morte celular varia de acordo com a dose de luz e fotossensibilizante empregada durante o tratamento. Nesse sentido, doses maiores de TFD resultaram em níveis mais elevados de indução de morte celular, com efeitos mais prolongados observados através do sinal bioluminescente decorridos 48 horas após a TFD. Conclusão: Este estudo demonstra que a técnica de imagem de bioluminescência pode ser utilizada para o estudo dos efeitos da terapia fotodinâmica em células tumorais. Trabalhos em animais estão em andamento no presente momento para validar a técnica de imagem de bioluminescência após TFD in vivo.