Characterization of the penicillin G acylase from Bacillus megaterium ATCC 14945
Braz. arch. biol. technol
;
48(spe): 105-111, June 2005.
Article
in English
| LILACS
| ID: lil-415463
RESUMO
O objetivo deste trabalho foi caracterizar a enzima penicilina G acilase (PGA) produzida por Bacillus megaterium, uma importante enzima industrial que catalisa a hidrólise de penicilina G, para produção de antibióticos semi-sintéticos. Purificação da enzima por ultra/diafiltração não permitiu detectar a banda de PGA por eletroforese SDS-PAGE devido ao elevado conteúdo de outras proteínas remanescentes. Contudo, utilizando DNA do microrganismo que vem sendo estudado, foi possível amplificar os genes das duas sub-unidades de PGA previstas na literatura, mostrando que a enzima em estudo é também constituída de duas sub-unidades, 245 e 537 aminoácidos cada, com massas moleculares médias de 26950 e 59070 Da, respectivamente. Foram estudadas as influências da temperatura 25-600C, pH 5-10, e concentração do substrato na velocidade da reação de hidrólise da penicilina G. A temperatura e pH ótimos foram de 370C e 8,0, respectivamente. O modelo de Michaelis-Menten representou bem a cinética da reação, com valores de parâmetros estimados de 1,83 mM para Km e Vmáx= 0,165*10-3 mmol/min/UI.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Language:
English
Journal:
Braz. arch. biol. technol
Journal subject:
Biology
Year:
2005
Type:
Article
/
Congress and conference
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
Departamento de Engenharia Química/BR
/
Universidade Federal de São Carlos/BR
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