Amplificación de ADN a partir de un molde unido a membrana / DNA amplification from a mold together with membrane

RESUMEN

con el fin de mantener muestras de ácido desoxirribonucleico (ADN) para amplificaciones sucesivas por PCR a partir de muestras de limitada disponibilidad debido a la dificultad para su obtención o extracción, y además poder ser almacenadas en pequeños espacios, se estandarizó una técnica para amplificaciones por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) usando como molde una cadena de ADN (ssDNA) unido a una membrana. Tres tipos de membranas (de nylon con carga positiva y sin carga, de nitrocelulosa y Zeta-Probe) y tres métodos de fijación (alcalino, luz ultravioleta y calor) fueron usados para amplificar tres loci humanos, tomando tres concentraciones de ADN para cada uno de ellos. Los mejores resultados fueron obtenidos cuando se usó la membrana de nylon sin carga, fijación con calor o luz UV, y el tamaño del amplificado estuvo por debajo de 500 pb y la concentración del ADN unida a la membrana fue mayor de 0,115 mgmL