Vias de sinalização envolvidas na invasão celular por formas amastigotas extracelulares de Trypanosoma cruzi das duas principais linhagens filogenéticas / Signal transduction pathwais involved in host cell invasion by T. cruzi amastigotes of strains from the two major phylogenetic lineages

RESUMO

Na primeira parte desta tese examinamos o papel de GTPases monoméricas da família Rho (Rho, Rac e Cdc42) no processo de invasão de células MDCK transfectadas (que superexpressam essas proteínas) por formas amastigotas e tripomastigotas metacíclicas de Trypanosoma cruzi das duas principais linhagens filogenéticas deste parasita. De acordo com os resultados obtidos determinamos que amastigotas intracelulares das diferentes cepas apresentam baixa infectividade nos diferentes transfectantes de células MDCK. A super expressão de GTPases monoméricas em células MDCK não afetou a infectividade da forma TM de diferentes cepas. Além disso, observamos que amastigotas extracelulares da cepa G invadiram mais significativamente o transfectante Rac1 V12 (constitutiva mente ativo) que os demais. Além disso, o transfectante Rac1 N17 (dominante-negativo) foi menos suscetível à infecção por amastigotas extracelulares da cepa G do que as células usadas como controle. Estes dados indicam que as proteínas Rac parecem estar relacionadas com a invasão celular por formas amastigotas extracelulares da cepa G de T. cruzi. Na segunda etapa deste trabalho estudamos as vias de transdução de sinal que são ativadas durante o processo de invasão celular por formas amastigotas extracelulares de T. cruzi das cepas G e CL, através de compostos que interferem direta ou indiretamente nas diversas rotas de sinalização. Demonstramos que AE das cepas G e CL de T. cruzi induzem um aumento na concentração de Ca 2+ intracelular em células HeLa de maneira dose-dependente. O tratamento dos parasitas com drogas que interferem na mobilização de cálcio intracelular não alterou a infectividade destes. Porém, o tratamento das células reduziu a infectividade dos AE das cepas G e CL. A…(au)