False positive reaction due to endogenous biotin activity in glandular epithelium of decidua
Braz. j. microbiol
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36(2): 109-113, Apr.-June 2005. ilus, tab
Article
in English
| LILACS
| ID: lil-421711
RESUMO
Sondas marcadas com biotina foram utilizadas neste trabalho para deteccão de infeccão viral por hibridizacão in situ em tecidos fixados com formalina e embebidos em parafina de 11 casos obtidos de abortamento. Sondas para citomegalovírus humano (HCMV), parvovírus B19 humano (B19) e adenovírus humano tipo 2 (HAd2), foram marcadas com biotina-11-dUTP através da reacão de nick-translation. Estreptavidina conjugada com fosfatase alcalina (SAP) seguida por solucão de 4-nitro-azul de tetrazolio/5-bromo-4-cloro-3-indolil fosfato (NBT/BCIP) foram utilizadas para deteccão da biotina após a reacão de hibridizacão. Reacão positiva foi observada no núcleo de células do epitélio glandular da decídua tanto no controle positivo quanto no negativo em tecidos de primeiro e segundo trimestre gestacional. Esta reacão não foi inibida com solucão bloqueadora da atividade endógena de fosfatase alcalina e persistiu mesmo com a omissão das sondas. O uso de controles negativos permitiu revelar atividade endógena de biotina nuclear em epitélio glandular da decídua, responsável por reacões falso positivas em sistemas de deteccão estreptavidina-biotina (StrepABC). Os resultados obtidos neste estudo fortemente recomendam que a deteccão de ADN por hibridizacão in situ em endométrio gestacional seja feita com outro sistema de deteccão que não o StrepABC.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Biotin
/
In Vitro Techniques
/
In Situ Hybridization
/
Cytomegalovirus Infections
/
Epithelium
Limits:
Humans
Language:
English
Journal:
Braz. j. microbiol
Journal subject:
Microbiology
Year:
2005
Type:
Article
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
FIOCRUZ/BR
/
Universidade Federal Fluminense/BR
/
Universidade Federal do Espírito Santo/BR
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