Avaliação da presença e atividade biológica de citocinas hematopoiéticas no colostro humano / Evaluation of the presence and biological activity of hematopoietics cytokines in colostrum human

RESUMO

Técnicas foram aplicadas para a detecção de citocinas por imunocitoquímica para as citocinas; por marcação intracelular em citometria de fluxo para as citocinas IL-4, IL-5,IL-6,INF-y e GM-CSF. As células do colostro são constituídas principalmente por macrófagos e lifócitos. A representação destas populações foi confirmada pela distribuição dos marcadores de superfície CD11b e CD3. A marcação intracelular com CD14 forneceu resultados comparáveis aos da marcação de superfície com CD11b. Em contraste, a freqüência de células com positividade para CD14 na superfície foi muito baixa, o que foi interpretado, como evidência de rápida conversão do CD14 de membrana em CD14 solúvel. As células T do colostro incluem subpopulações com marcadores fenotípicos de ativação CD69,e subpopulações com marcadores fenotípicos de células de memória CD45RO. Foram encontradas células com marcação para o CD158, indicando a presença de células NK. Evidenciou presença das citocinas imuno-regulatórias IL-4, IL-5 em microscopia ótica e IL-4, IL-5 e INF-y, por detecção intracitoplasmática em citometria de fluxo. Estes resultados permitiram caracterizar a presença de células Th1 e Th2 no colostro. Foram igualmente detectadas IL-10, TNF-a e GM-CSF, e associadas a macrófagos. Evidenciou a presença de fatores hematopoiéticos biologicamente ativos utilizando como bio-ensaio a indução de proliferação e a manutenção da viabilidade celular em culturas líquidas de células hematopoiéticas do sangue de cordão umbilical. Colostro teve atividade superior à da associação GM-CSF/IL-3 num período de 7-14 dias de cultura. A atividade biológica foi perdida progressivamente com períodos crescentes. A transferência de um número expressivo de células da mãe para o recém-nascido com capacidade de secretar citocinas biologicamente ativas, a presença de linfócitos T de memória, e o estado ativado em que muitas células se encontram, além das atividades biológicas demonstradas ex vivo, são compatíveis com a hipótese de que o colostro exerce um importante papel na imunomodulação da criança. Os resultados apontam, em estudos futuros os alvos da ação das citocinas detectadas, no próprio colostro e/ou no revestimento do trato digestivo; possíveis mecanismos pelos quais a transferência adotiva de imunidade inata e adquirida via colostro possa exercer efeitos sistêmicos no lactente.