Estudo comparativo entre métodos morfológico, imunológico e molecular aplicados ao diagnóstico da criptosporidiose em amostras fecais de pacientes portadores do vírus hiv e com aids / Cryptosporidiosis: comparative study of morfological, immunological and molecular diagnosis methods in fecal samples from patients with hiv and aids

RESUMO

Cryptosporidium parvum, protozoário da sub classe Coccidia, é um agente causador de diarréia aguda no homem e outros animais. A criptosporidiose é auto-limitada em indíviduos sadios, mas se apresenta como uma doença grave e crônica nos pacientes imuno-comprometidos, principalmente com AIDS. O diagnóstico laboratorial é feito geralmente pela detecção do parasita por métodos morfológicos, mas técnicas imunológicas ou moleculares podem também ser usadas. Neste estudo, utilizaram-se 100 amostras fecais, provenientes de pacientes portadores de HIV e com AIDS, que já haviam sido analisadas previamente por métodos parasitológicos. Estas amostras foram submetidas a diferentes métodos de detecção para Cryptosporidium sp, o método morfológico (visualização através de coloração por Kinyoun) e o teste imunoenzimático (ELISA) para pesquisa de coproantígenos. Destas, foram selecionadas 29 amostras, sendo 15 positivas e 14 negativas para Cryptosporidium pela coloração de Kinyoun, as quais foram submetidas à metodologia molecular de “Nested” PCR (N-PCR). Entre as 15 amostras positivas para Cryptosporidium por método morfológico, 13 foram positivas por ELISA e apenas 11 por N-PCR. Duas amostras positivas por método morfológico e negativas por ELISA, apresentaram-se negativas por N-PCR. Das 16 amostras positivas por N-PCR, 11 foram positivas e cinco negativas por métodos morfológico e ELISA. O método de coloração pelo Kinyoun demonstrou ser ainda um bom método para ser utilizado na rotina diagnóstica da criptosporidiose. O teste de ELISA apresentou resultados compatíveis com os resultados obtidos na coloração de Kinyoun e, devido à capacidade de automação, pode ser empregado em estudos epidemiológicos, otimizando exames em grande demanda. O método molecular (PCR e N-PCR), para ser introduzido em nosso meio como método de rotina diagnóstica da criptosporidiose, necessita de aprimoramentos nas técnicas de extração de DNA, entretanto já é conhecida sua sensibilidade e especificidade, constituindo-se em importante ferramenta para estudos epidemiológicos com a possibilidade de caracterizar diferentes espécies e genótipos de Cryptosporidium