Viable spore counts in biological controls pre-sterilization

RESUMEN

El objetivo de este trabajo fue evaluar el recuento total de esporos viables en tiras inoculadas estandarizadas antes de ser sometidas a ciclo de esterilización. Se utilizaron muestras de "Bacterial Spore Sterilization Strip" (R. Biological Lab) dentro de la fecha de vencimiento, que fueron divididas en: grupo A (B subtilis) y en grupo B (B stearothermophylus). Se testearon 24 tiras de cada grupo. Las tiras, en grupos de tres, fueros trituradas y colocadas en agua destilada refrigerada estéril. Luego se homogeneizaron las suspensiones en vortex durante 5 minutos y se transfirieron 10 ml de cada grupo a dos frascos estériles. Las muestras se calentaron en baño de maría a 95ºC (grupo A y 80ºC (grupo B) durante 15 minutos y se las enfrió bruscamente en un baño de hielo entre 0º a 4ºC durante 15 minutos. Se realizaron diluciones sucesivas hasta obtener una alícuta final que estuviera entre 30 y 300 UFC (unidades formadoras de colonias) que fue colocada en placas de Petri que contenían el medio de cultivo (agar extracto de soja caseína fundido, adaptado para esporos y enfriado a 45-50ºC. Se realizaron las incubaciones a 55ºC y 37ºC. El número de esporos presentes a las 48 horas fue mayor que el número presente a las 24 horas, si bien estos resultados no fueron homogéneos en todos los grupos. Los datos fueron analizados estadísticamente. El controlar el recuento de esporos viables pre-esterilización evitaría falsos resultados. La cantidad de esporos viables no debe ser menor al 50 por ciento ni mayor al 300 por ciento del número de esporos de la cepa específica en el control biológico. Este procedimiento es importante para garantizar la eficacia del control biológico