Comparison of DNA-extraction methods and Selective Enrichment broths on the detection of Salmonella Typhimurium in swine feces by polymerase chain reaction (PCR)
Braz. j. microbiol
;
36(4): 363-367, Oct.-Dec. 2005. tab
Article
in English
| LILACS
| ID: lil-433475
ABSTRACT
O objetivo do presente estudo foi comparar diferentes técnicas de extração de DNA, realizadas a partir de três diferentes caldos de enriquecimento seletivo, na sua eficiência em detectar Salmonella Typhimurium em amostras de fezes suínas artificialmente inoculadas (100 UFC/g), pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). Após enriquecimento em Rappaport-Vassiliadis, selenito-cistina e tetrationato Müller-Kauffmann, alíquotas destes caldos foram utilizadas para extração do DNA, empregando três métodos diferentes, (a) fervura-centrifugação, (b) fenol-clorofórmio e (c) precipitação por sal. A eficiência dos métodos de extração de DNA por fervura-centrifugação e precipitação por sal foi a mesma, independentemente do caldo de enriquecimento seletivo utilizado. O caldo Rappaport-Vassiliadis apresentou maior eficiência (P<0,05) quando foi empregada a extração de DNA pelo método fenol-clorofórmio. Considerados os parâmetros custo e eficiência, os resultados do estudo indicaram que a partir de amostras fecais suínas a utilização do caldo tetrationato Müller-Kauffmann combinado a técnica de extração do DNA por fervura-centrifugação devam representar a melhor opção, relativamente às demais técnicas testadas.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Salmonella typhimurium
/
Swine
/
In Vitro Techniques
/
DNA
/
Feces
Type of study:
Diagnostic study
Language:
English
Journal:
Braz. j. microbiol
Journal subject:
Microbiology
Year:
2005
Type:
Article
/
Project document
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
Universidade Estadual Paulista/BR
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