Brucelose canina: obtenção de antígenos e avaliação pela técnica de imunodifusão em gel de sacarose / Canine Brucellosis: antigen obtention and evaluation by Agar Gel Immunodiffusion

RESUMO

Cães com brucelose causada por arucella canis apresentam poucos sinais importantes de doença sistêmica e nenhum deles especifico para brucelose. Devido às limitações dos procedimentos bacteriológicos, casos suspeitos devem ser avaliados sorologicamente. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização de antigenos externos e internos de arucella canis e de arucella ovis, pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IOGA). Antigenos externos e internos foram extraidos por solução salina tamponada e fosfatada (PBS) a quente a partir das cepas RM 6/66 de arucella canis e REO 198 de arucella ovis cultivadas em Ágar e Caldo Tripticase soja (Meio de Castaneda). Os antigenos externos foram obtidos após centrifugação e concentração do sobrenadante por ultrafiltração. Simultaneamente os sedimentos foram submetidos ao ultra-som e centrifugados sendo a porção sobrenadante considerado o extrato cru sonicado de a. canis e de a. ovis (antigeno interno). Soro hiperimune anti a. canis e anti a. ovis foram obtidos por inoculação intraperitoneal em coelhos (a. canis e a. ovis ), em cadela (a. canis) e em ovelha (a. ovis ) sendo utilizados como controles positivos na avaliação diagnóstica. Para referenciar os antigenos produzidos utilizou-se, ainda, soros de cães provenientes de um canil comercial localizado no Rio de Janeiro, RJ, suspeito de infecção brucélica pela ocorrência de abortos e natimortos. Houve resposta sorológica aos antigenos obtidos e a enfermidade foi confirmada por isolamento do agente etiológico, a partir de hemoculturas, em três animais do canil. Concluiu¬se que os antigenos externos apresentaram melhor resposta em animais experimentalmente inoculados e em naturalmente infectados, mas a confirmação deve ser feita com o antigeno sonicado