Effect of concentration and exposure period to butyrolactone I on meiosis progression in bovine oocytes

ABSTRACT

The effect of concentration and exposure period of bovine oocytes to butyrolactone I (BLI) on meiotic block and in vitro maturation (IVM) kinetics was studied. In experiment 1, all oocytes were at germinal vesicle stage (GV), after 6h in culture with 0, 50 and 100æM BLI. After 12h, all oocytes cultured with 50 and 100æM BLI remained in GV. After 24h, less oocytes were in GV with 50æM (82 percent) than with 100æM BLI (99 percent, P<0.05). In experiment 2, after 6h IVM, 93 percent of control oocytes (IVM only) were in GV, while treated oocytes (100æM BLI for 6, 12 or 24h prior to IVM) showed less oocytes in GV with increased exposure period to BLI prior to IVM (83 and 73 percent, for 6h and 12h, P<0.05). For a 24h inhibition, GV rates were similar to 12h (70 percent, P>0.05). After 18h IVM, metaphase II (MII) rates were similar for all groups (76-81 percent). In experiment 3, after 6h IVM, 74 percent of treated oocytes (50 or 100æM BLI for 12h) were in GV. This rate was lower than for control oocytes (97.3 percent, P<0.05). After 18h IVM more oocytes (~80 percent, P>0.05) were in MII with BLI than for control (73 percent, P<0.05). Shorter culture periods require lower BLI concentration for meiotic block; initial nuclear maturation kinetics of oocytes cultured with BLI is accelerated, and this is affected by culture period but not by drug concentration.

RESUMO

Estudou-se o efeito da concentração e do tempo de exposição à butirolactona I (BLI) no bloqueio meiótico e na cinética da maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos. No experimento 1, todos os oócitos encontravam-se em vesícula germinativa (VG) após 6h de cultivo nas concentrações de 0,50 e 100æM BLI. Após 12h, somente oócitos cultivados com BLI (50 e 100æM) estavam em VG. Após 24h, menos oócitos tratados com 50æM (82 por cento) estavam em VG em relação a 100æM (99 por cento, P<0,05). No experimento 2, após 6h de MIV, 93 por cento dos controles (somente MIV) estavam em VG, enquanto que nos tratados (100æM BLI por 6, 12 ou 24h pré-MIV), menor proporção de oócitos permaneceu nesse estádio com o aumento do tempo de exposição à BLI antes da MIV (83 e 73 por cento para 6 e 12h, P<0,05). Com 24h de exposição, a taxa de VG foi similar à de 12h (70 por cento, P>0,05). A taxa de metáfase II (MII, 76-81 por cento) foi similar para todos os tempos de exposição, após 18h de MIV. No experimento 3, após 6h de MIV, menos oócitos tratados (74 por cento para 50 ou 100æM BLI por 12h) estavam em VG comparados aos controles (97 por cento, P<0,05). Após 18h de MIV, mais oócitos estavam em MII com BLI (~80 por cento, P>0,05) do que os controles (73 por cento, P<0.05). Conclui-se que para cultivos mais curtos, a concentração mais baixa de BLI bloqueia a meiose a cinética da maturação nuclear é acelerada em oócitos expostos à BLI e isso é afetado pelo tempo de cultivo, mas não pela concentração da droga.