Estudo da especificidade da calicreína 6 humana(hK6) / Study of specificity of human kallikrein 6(hK6)

RESUMO

Calicreína 6 humana (hK6) é uma serino-protease tripsina-símile expressa em altos níveis no sistema nervoso central que está envolvida em doenças neurodegenerativas como mal de Alzheimer e esclerose múltipla. Este trabalho fornece dados a respeito da especificidade da enzima e sua ativação por glicosaminoglicanos e sais cosmotrópicos da série de Hofmeister. A utilização de peptídeos FRET possibilitou identificar a sequência Abz-AFRFSQ-Eddnp como o melhor substrato sintético descrito para hK6 (kcatlKm = 38,667 mM.sr1 até o momento. Análises de blast demonstraram que a sequência AFRFS está presente no domínio amino-terminal dos receptores ionotrópicos de glutamato, semaforinas e acetilcolinesterase. Foi observado também que hK6 cliva substratos derivados de APP (proteína precursora amilóide), centro reativo do loop da a1-antiquimotripsina, proteína básica de mielina humana (M8P), plasminogênio e sítios de clivagem da pró-hK6, todos previamente descritos como prováveis substratos naturais da hK6. Além disto, peptídeos FRET derivados de seqüências dos receptores ativados por proteases (PARs) 1-4 foram ensaiados com a enzima, sendo hidrolisado somente o substrato com a sequência do PAR-2. Os resultados sugerem que hK6 desempenhe um papel importante em processos neurodegenerativos modulando a atividade de receptores ionotrópicos de glutamato e ativando PAR-2.