Preliminary antigenic characterisation of an adult worm vomit preparation of Fasciola hepatica by infected human sera

ABSTRACT

Fascioliasis is an emerging/re-emerging vector-borne disease with the widest known distribution. Approximately 17 million people are infected around the world, being the Andean region the most affected area. There is an important necessity to develop sensitive and specific diagnostic tools to treat patients early and to avoid complications. In this paper we evaluated the immune response of infected humans against two antigenic preparations the total soluble extract (FhTSE) and the adult worm vomit (FhAWV) in order to identify antigenic fractions specific for Fasciola hepatica. Both preparations were processed by SDS-PAGE and Western blot with human sera with fascioliasis (F), other parasitosis and healthy individuals. In the immunoblot of FhTSE, sera F recognised 16 bands with MW between eight and 110 kDa, from which those of 8, 9, 10, 38, 45 and 57 kDa were specific. In the preparation FhAWV, sera F recognised nine bands with MW from eight to 85 kDa, from which those of 8, 12, 15 and 24 kDa were specific. Some bands of cross-reaction were evident with sera from patients with other parasitoses, more frequent with the FhTSE. Bands within the MW mentioned, particularly that of eight kDa, have been shown to be specific by others, and deserve additional characterisation for their potential use in immunodiagnosis.

RESUMO

Fasciolíase é uma doença emergente/re-emergente transmitida por vetores com a distribuição sabidamente mais ampla. Existem aproximadamente 17 milhões de pessoas infectadas em todo mundo, sendo a região andina a área mais afetada. Há uma necessidade importante para desenvolver ferramentas diagnósticas sensíveis e específicas para tratar cedo os pacientes e para evitar complicações. Neste trabalho avaliamos a resposta imune de seres humanos infectados comparando a duas preparações antigênicas o extrato solúvel total (FhTSE) e o vômito (FhAWV) do verme adulto a fim de identificar as frações antigênicas específicas para Fasciola hepatica. Ambas as preparações foram processadas por SDS-PAGE e Western blot com os soros humanos de portadores de fasciolíase (F), outras parasitoses e indivíduos saudáveis. No immunoblot de FhTSE, os soros F reconheceram 16 faixas com PM entre 8 e 110 kDa, das quais as de 8, 9, 10, 38, 45 e 57 kDa foram específicas. Na preparação de FhAWV, os soros F reconheceram 9 faixas com PM entre 8 e 85 kDa, das quais as de 8, 12, 15 e 24 kDa foram específicas. Algumas faixas com reação cruzada foram evidentes com os soros dos pacientes com outras parasitoses, mais freqüentes com o FhTSE. As faixas dentro do PM mencionado, particularmente aquela de 8 kDa, mostraram ser específicas por outros autores, e merecem a caracterização adicional para seu uso potencial no diagnóstico imunológico.