Isolamento de clones imunoreativos e caracterização in silico de novos antígenos recombinantes de Leishmania chagasi / Isolation of immunoreactive clones and characterization in silico of new recombinant antigens of Leishamania chagasi

RESUMO

As leishmanioses são endêmicas em mais de 88 países e representam um sério problema de saúde pública no Brasil. O diagnóstico precoce,o controle vetorial e,até recentemente,a eliminação de cães soropositivos, constituem a única abordagem para a luta contra a leishmaniose visceral.O sorodiagnóstico humano e canino, contudo,é dificultado por reações cruzadas com outras doenças e pelas dificuldades na padronização do antígeno para a produção de testes em larga escala para os programas de saúde pública.Antígenos recombinantes podem potencialmente contornar ambos os problemas e contribuir para uma redução do custo de produção.Atualmente apenas 2 antígenos recombinantes estão no mercado para o diagnóstico do calazar.Patentes concedidas...pelo calazar no Mundo podem restringir de forma severa as possibilidades de desenvolvimento de um teste nacional livre de pagamentos de royalties pelo seu uso em programas de saúde pública, tanto para o diagnóstico como para a vacinação e a imunoterapia.Neste trabalho descrevemos o isolamento e a caracterização de 10 novos antígenos reconhecidos pelos anticorpos séricos de humanos ou cães com calazar.A triagem de uma biblioteca de cDNA de Leishmania chagasi com soros previamente imunoadsorvidos contra um fragmento de HSP70 recombinante permitiram o isolamento de clones expressando HSP83,K39 e novos antígenos,pertencentes a 2 categoriasproteínas hipotéticas ou proteínas com função conhecida,podendo ser enzimas ou proteínas estruturais; exceto por um caso,as proteínas não haviam sido previamente descritas como antígeno nas leishmanioses. Não houve antígenos comuns às 2 triagens,exceto os antígenos imunodominantes HSP83 e K39.Alguns dos 10 novos antígenos têm repetições de aminoácidos curtas ou longas, que podem sugerir um mecanismo para conferir a antigenicidade nestas proteínas.Domínios e motivos puderam ser identificados em alguns destes antígenos, assim com funções prováveis atribuídas e localização intracelular.Os epitopos...